從藥物開發、再生醫學和即時診斷,到生物傳感器開發和免疫或癌癥的生物學研究,基于活細胞的檢測方法在各種應用中都極具價值。自2013年發表第一項研究以來,MP-SPR技術已成為研究活細胞的一種有價值的工具,可以替代熒光顯微鏡或流式細胞術等傳統方法。雖然使用傳統SPR儀器進行的細胞研究很少,但在最近的一些研究中,MP-SPR能夠闡明納米顆粒攝取動力學、藥物吸收途徑和GPCR激活譜。
MP-SPR是市場上少有的允許活細胞的生物學相關反應,同時保持這些活模型的復雜性的實時技術。使用MP-SPR,根據研究需要,活細胞測定可采用以下兩種主要方法:
1、在傳感器表面生長細胞
使用標準細胞培養方案在傳感器表面培養細胞,樣品分析物(納米顆粒,藥物化合物)被引入到流程中,對分析物的實時細胞反應進行評估,并闡明細胞激活或細胞攝取概況。這種方法有助于研究:
a、給定藥物化合物的吸附路線
b、藥物遞送的最佳納米顆粒
c、活細胞樣品最大有效濃度(EC50)的一半
d、納米顆粒或病毒進入細胞的方式
MP-SPR技術已經成功地進行了基于細胞的分析,分析物范圍從小分子藥物化合物、激素和蛋白質,到無機納米顆粒、脂質體和細胞外囊泡。
2、在傳感器表面注入活細胞
活細胞被引入流過傳感器表面的液體(細胞介質)中,表面用給定的表面涂層(如脂質膜)或表面配體(受體)修飾。該方法適用于結合/粘附研究,并提供以下信息:
a、細胞對表面受體(如肽)的親和力
b、細胞附著涂層的動力學特征
c、結合細胞與表面的分離
d、給定細胞群的表面特異性
e、表面的最佳防污或抗菌性能
MP-SPR技術已經在細胞和細菌中進行了探索,使用不同的涂層,如羥基磷灰石、脂質膜、聚合物,并使用各種配體(如肽、抗體和蛋白質復合物)進行功能化。
3、MP-SPR面對活細胞的其他優勢:
a、適用于多種活細胞
b、無標簽的實時結合/粘附研究
c、擴展數據集從細胞響應在樣本加載
d、靈活選擇細胞兼容的表面
e、測量期間保持的生理相關條件
f、MP-SPR與電化學和熒光的結合